PCR是利用一段DNA為模板，在DNA聚合酶和核苷酸底物共同參與下，將該段DNA擴(kuò)增至足夠數(shù)量，以便進(jìn)行結(jié)構(gòu)和功能分析。PCR醫(yī)學(xué)檢測(cè)方法在臨床上快速診斷細(xì)菌性傳染病等方面具有極為重要的意義。
PCR原理用于擴(kuò)增位于兩段已知序列之間的DNA片段，類似于天然DNA的復(fù)制過程。以擬擴(kuò)增的DNA分子為模板，以一對(duì)分別與模板5’末端和3’末端互補(bǔ)的寡核苷酸片段為引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留復(fù)制的機(jī)制沿著模板鏈延伸直至完成新的DNA合成，重復(fù)這一過程，即可使目的DNA片段得到擴(kuò)增。
PCR醫(yī)學(xué)檢測(cè)先根據(jù)試劑盒說明書樣本要求，進(jìn)行標(biāo)本采集，常規(guī)的樣本類型包括咽拭子、鼻拭子、痰液、支氣管灌洗液、肺泡灌洗液等。獲得患者樣本后需盡快進(jìn)行檢測(cè)，如無法立即檢測(cè)需要轉(zhuǎn)運(yùn)的樣本，應(yīng)按照說明書的要求進(jìn)行低溫封存，并送到專門的檢測(cè)機(jī)構(gòu)進(jìn)行檢測(cè)。檢測(cè)機(jī)構(gòu)收到樣本后會(huì)對(duì)樣本進(jìn)行核酸提取。核酸提取試劑應(yīng)使用批準(zhǔn)的、產(chǎn)品說明書中的核酸提取試劑盒，病毒RNA先需要轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)錄為cDNA，再進(jìn)行擴(kuò)張檢測(cè)。PCR檢測(cè)應(yīng)使用批準(zhǔn)產(chǎn)品說明書中的熒光定量PCR儀，通過熒光定量PCR所得到的樣本CT值的大小，可以判斷患者樣本中是否含有的病毒。
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